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时间:2020-06-22 02:12  编辑:安顺考驾照

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IC-PAK 阴离子交换柱使用指南

2.3平衡

The Ion Exclusion 色谱柱运输过程采用 10%甲醇溶液储存,在用测试溶液和向之前必 需平衡活化色谱柱

平衡色谱柱:1. 将色谱柱安装到仪器上。

2. 用要求的洗脱液以 0.5Ml/min的流速平衡 10分钟,将大部分甲醇冲出 色谱柱。

3. 以 0.1mLl/min的梯度的缓慢增加流速到 1.0mL/min

4采用 1.0mL/min流速平衡 20分钟,或者当基线平稳后才开始分析。 如果基线不稳,检查 LC 系统的其他部分。

3.1准备洗脱液

指导原则:1. 推荐的洗脱液是稀释的酸的水溶液

注意:当流动相采用高浓度的有机相(超过 20%)降低柱子的使用效果。 避免胺类,金属类,碱类和腐蚀剂,例如 HCL.

2. 用 0.45um 或者更小孔径的滤膜过滤洗脱液以除去微生物。用超纯水(18 megohm resistivity) , 例如 MILLI-Q 的水。

3. 使用真空脱气机 /超声波去掉可溶于水的气体(影响泵)

4. 使用 Waters 在线过滤系统保护系统。

3.2样品制备和过滤

如果样品中含有那些可溶解的并且可能污染色谱柱的污染物或微粒,选用以下其中一 种步骤:

1. 用 Waters Sample Clarification包,或者 Millex 过滤样品,避免色谱柱堵塞反压增 加。

2. 用 SEP-PAK 小柱净化样品,避免污染物降低柱寿命。更多的信息请看 WC02.

3. 用 IC-PAK 保护柱,能吸收化学和物理污染物。附录 A 是保护柱清单。

4.1色谱柱指南

注意:新色谱柱使用前,请按 4.2方法测试样品的分离。

指导原则:下面的操作指南能帮助您在 Waters 色谱柱上得到最好的的效果。

1. 不要超过 13MPa ( 13atm或 2000psi )压力下使用

2. 过滤所有的洗脱液。决不能使用混浊,有沉淀的流动相。

3. 保护色谱柱,避免振动,机械性外力(导致洗脱液成分改变)

4. 当用水做流动相组分时, 请用 Milli-Q 水系统纯化的水。 我们可以选择去离子水或 瓶装色谱级水,某些有机化合物改变柱子的敏感性。

4.2柱效测试

4.3洗脱液制备

10mM 辛烷磺酸溶液:1. 2.163g 辛烷磺酸钠盐()溶解在 100mL Milli-Q 水中。

2. 添 加 100mL 预 先 净 化 的 H +离 子 形 式 的 阳 离 子 交 换 树 脂

(,搅拌均匀。

3. 过滤树脂,加大约 800mL Milli-Q水,再稀释到 1L 。

注意:10mM 辛烷磺酸溶液可稳定 1个月以上。

1mM 辛烷磺酸溶液:1. 100mL辛烷磺酸溶液加入 1L 溶剂瓶中。

(pH3) 2. 用 Milli-Q 水稀释到 1L.

3. 用 过滤。

酸中的 H +离子影响分离,酸的阴离子数目没有影响但能改变背景的传导性。因此, 可用辛烷磺酸取代其他强酸。

弱酸在 205nm 到 215nm 之间被紫外吸收检测。

4.4标准溶液的配制

1. 用其钠盐制备 1000ppm 的储备标准溶液

2. 工作标准溶液,稀释:0.1mL 的 1000ppm 的氟化物 /0.5mL的 1000ppm 的甲酸盐 /1.0mL的 1000ppm 的醋酸盐 /1.0mL的 1000ppm 的丙酸盐 /1.0mL的 1000ppm 的丁酸盐 到 100mL Milli-Q水中。

注意:工作标准溶液应该每周配制。

5.1 故障排除

5.1表中列出出了使用过程中可能碰到的问题以及解决的方法。

5.2 清洗和再生色谱柱

如果发生:

1. 更换入口筛板。

2. 以 1.0mL/min的流速反冲 15分钟。

3. 重新检查柱效。

当出现不明的色谱柱污染物或旧色谱柱或最初检查柱效时反压增加,可以采取以上步 骤。

尽管保护柱能保护色谱柱不被化学污染物和某些物质的污染,仍然有必要清洗色谱 柱。

可用 0.1N H3PO4, 0.1N HNO3或者 0.1M H2SO4 清洗色谱柱。

可用 90%水和 10%甲醇溶液清洗吸附了有机物的树脂。最初清洗时可用低流速,再 缓慢增加流速。在任何流动相和洗脱液中不要有超过 20%有机溶液组分。

5.3色谱柱储存

色谱柱可储存在新鲜的洗脱液或 10%的甲醇水溶液中。

储存色谱柱时:请记住:

1. 不要仅用水储存色谱柱。仅用水保存色谱柱可能导致色谱柱长菌。用 10%甲醇水溶 液保存色谱柱可防止长菌。

2. 没有洗脱液流动时不要将柱子留在高温下。

3. 拧紧柱子两端堵头放回包装盒中,柱床干涸可能影响色谱柱的效果。

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